近年來，CRISPR/Cas9系統(tǒng)以其簡便、高效的技術(shù)特點，迅速成為植物中最為廣泛使用的基因組編輯手段，為種質(zhì)資源創(chuàng)制以及基因功能研究等工作提供了極大的便利。CRISPR/Cas9系統(tǒng)在基因組上的精準(zhǔn)切割需要特異識別一段鄰近核苷酸序列(PAM)。目前植物中最為廣泛使用的SpCas9蛋白能夠識別的PAM序列局限為經(jīng)典的NGG序列，這嚴重限制了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的可編輯范圍。為突破這個限制，科學(xué)家們在動物及微生物中進行了不懈的嘗試并獲得了一定的進展，然而在植物中尚未有成功的案例報道。
該創(chuàng)新團隊通過定點突變的方法對水稻中廣泛使用的SpCas9蛋白進行了改造，獲得了兩種Cas9 變體。通過一系列的轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炞C明，兩種Cas9變體在水稻中分別可以識別NGA以及NGCG兩種PAM序列。生物信息學(xué)分析表明Cas9變體的創(chuàng)制將使得CRISPR/Cas9系統(tǒng)在水稻中可編輯范圍拓展到現(xiàn)有的2倍以上。此外，兩種變體也可以同時對多基因進行有效的編輯，表明其與野生型Cas9一樣具備巨大的應(yīng)用潛力。因此，該工作為在水稻中進行更廣泛的基因組編輯提供了新的可選工具。
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